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技術(shù)文章

ELISA試劑盒也可用于測(cè)定抗體

閱讀：259發(fā)布時(shí)間：2016-8-15

根據(jù)檢測(cè)目的和ELISA試劑盒操作步驟不同，有以下三種類(lèi)型的常用方法：

1.間接法  
    此法是測(cè)定抗體zui常用的方法。將已知抗原吸附于固相載體。加人待檢標(biāo)本（含相應(yīng)抗體）與之結(jié)合。洗滌后，加人酶標(biāo)抗球蛋白抗體（酶標(biāo)抗抗體）和底物進(jìn)行測(cè)定。

2.雙抗體夾心法  
    此法常用于測(cè)定抗原。將已知抗體吸附于固相載體，ELISA試劑盒加人待檢標(biāo)本（含相應(yīng)抗原）與之結(jié)合。溫育后洗滌，加人酶標(biāo)板中。

3.競(jìng)爭(zhēng)法  
    此法可用于抗原和半抗原的定量測(cè)定。以測(cè)定抗原為例，將特異性抗體吸附于固相載體。加入待測(cè)抗原和一定量的酶標(biāo)已知抗原，使二者竟?fàn)幣c固相抗體結(jié)合；經(jīng)過(guò)洗滌分離，zui后結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原與待測(cè)抗原含量呈負(fù)相關(guān)。ELISA試劑盒過(guò)程包括：抗原吸附在固相載體上，這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為包被，加待測(cè)抗體, 再加相應(yīng)酶標(biāo)記抗體，生成抗原--待測(cè)抗體--酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物，再與該酶的底物反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。借助分光光度計(jì)的光吸收計(jì)算抗體的量。

 


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