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免疫熒光非特異性染色

時(shí)間：2017/6/22閱讀：2563
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免疫熒光非特異性染色

二甲苯脫蠟 過夜

其余的脫蠟、水化每個(gè)3分鐘

TBS清洗3次

0.2%胰酶修復(fù) 37度 過夜

高壓加枸櫞酸修復(fù) 3分鐘

一抗室溫孵育 過夜 濃度1：100

TBS清洗3次

熒光二抗孵育 37度 1小時(shí) 濃度1：200（也嘗試過室溫過夜）

TBS清洗

猝滅劑封片

做免疫熒光，出現(xiàn)非特異性染色，目的熒光應(yīng)該在胞質(zhì)可是胞核部位的非特異性染色特別強(qiáng)，我的染色步驟是PBS洗三遍，4%多聚甲醛固定30min，pbs洗三遍，0.2%Triton x-100 5min，pbs洗三遍，5%山羊血清 30min，一抗 37度 1h，pbs 洗三遍，二抗 37度 1h，pbs 三遍，hoechst 2min，pbs洗三遍

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