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技術(shù)文章

elisa實(shí)驗(yàn)避免加樣出錯(cuò)的小竅門

閱讀：288發(fā)布時(shí)間：2015-3-26

elisa實(shí)驗(yàn)避免加樣出錯(cuò)的小竅門

大家在做ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒的時(shí)候是不是經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)樣品加錯(cuò)或重復(fù)添加的情況呢？那么怎樣能zui大限度的避免這種情況的發(fā)生呢，下面上海研晶的實(shí)驗(yàn)經(jīng)歷分享給大家來(lái)解決這個(gè)問題。

ELISA是免疫學(xué)中常用檢測(cè)方法，加樣時(shí)淡黃色的血清能明顯的區(qū)分哪個(gè)孔加了哪個(gè)孔沒加。但是有一些項(xiàng)目，需要稀釋血清（例如在做乙肝病毒核心抗體時(shí)是要稀釋血清30倍），稀釋后淡黃色的血清近乎無(wú)色，加樣時(shí)非常容易搞錯(cuò)，很難區(qū)分哪個(gè)孔加過哪個(gè)孔沒加過。在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。ELISA試劑盒制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、血塊收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液，再在其加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。

下面舉幾個(gè)小竅門，來(lái)避免加樣出錯(cuò)：

1.用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報(bào)紙，墊在下面，這樣，加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會(huì)變小，沒加的字正常，非常容易區(qū)分。

2.可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別。

3.在標(biāo)本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，也可以加以區(qū)分。


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