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技術(shù)文章

WB實(shí)驗(yàn)的錦囊妙計(jì)

閱讀：184發(fā)布時(shí)間：2016-3-3

    Western Blot實(shí)驗(yàn)它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。其基本原理是通過特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的信息。于此同時(shí)，我們好多客戶反映做該實(shí)驗(yàn)檢測(cè)失敗，由此分析：WB實(shí)驗(yàn)真的不好做，還是客戶沒有把握好WB實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)或者小訣竅？現(xiàn)恒遠(yuǎn)公司年終總結(jié)做WB實(shí)驗(yàn)的錦囊妙計(jì)：

1.清洗好玻璃板，我公司技術(shù)強(qiáng)調(diào)這一步工作不能偷懶，很多時(shí)候跑完電泳撬膠時(shí)會(huì)因?yàn)椴ＡО宀桓蓛裟z粘在板上把膠撬破。

2. 配膠時(shí)不要反復(fù)用槍混，稍微搖混就可以了，用槍混多次會(huì)導(dǎo)致膠凝不好影響電泳圖的分辨率。

3. AP 分裝成500 微升一管保存放20 度，避免 AP 用太久失效。

4. 倒膠時(shí)把玻璃板中的水用濾紙盡量吸干，因?yàn)槲⒘康乃嬖跁?huì)影響配的膠濃度。 

5. 盡量不用過ye放室溫或者四度的膠，也回影響膠 的分離效果。 

6. 電泳完撬膠時(shí)根本不需要用撬膠板，在一平皿里裝好水，把有膠一面的放在水中晃動(dòng)幾 

次膠很容易就脫落下來，一點(diǎn)沒有問題，方便的很。

7. 點(diǎn)樣時(shí)樣品別忘了離心這步，因?yàn)樯蠘雍泄腆w沉淀會(huì)影響電泳圖分辨效果。

8.盡量在冰浴狀態(tài)下跑

 


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