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上海酶聯(lián)生物研究所


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經(jīng)營(yíng)模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:4010條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:采購(gòu)部 (經(jīng)理)

技術(shù)文章

單克隆抗體技術(shù)——脾細(xì)胞

閱讀:343發(fā)布時(shí)間:2011-12-23

1.材料
(1) 免疫過(guò)的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。
(2) 1640培養(yǎng)液
(3) 2.5%FCS-1640營(yíng)養(yǎng)液
2.操作方法
(1) 拉頸或用CO2處死小白鼠。
(2) 將小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在無(wú)菌條件下取脾。
(3) 把脾放入5ml含有2.5%FCS的1640液中,冰浴下輕輕洗去脾上的紅血球。
(4) 用鑷子輕輕擠壓脾,做成脾細(xì)胞懸液,用毛細(xì)管將懸液移入小試管中。
(5) 直立小試管3min,使大塊的結(jié)締組織下沉,把細(xì)胞懸液移入離心管中。
(6) 以2.5%FCS—1640充滿(mǎn)離心管,并以400g離心7min~10min(與此同時(shí)應(yīng)開(kāi)始制備骨髓細(xì)胞)。
(7) 把沉淀用約10ml的新鮮培養(yǎng)液再懸浮。
(8) 重復(fù)⑹、⑺步驟。
(9) 計(jì)算細(xì)胞,以臺(tái)盼蘭染色用相差顯微鏡檢查,活細(xì)胞數(shù)應(yīng)高于80%為合格。


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