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373次本試劑僅供研究使用 標本:血清或血漿
試驗原理:
Resistin試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知Resistin濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將Resistin和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。人抵抗素ELISA檢測試劑盒再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Resistin的濃度呈比例關(guān)系。
自備材料
1.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,人抵抗素ELISA檢測試劑盒吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。
2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的Resistin標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的Resistin含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-240pg/ml
4、敏感度: 0.1 pg/ml
XR-E-08915 B-細胞淋巴瘤因子2(Bcl2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) ,適用種屬: Oryctolagus cuniculus (Rabbit) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08916 丙酮酸脫氫酶α(PDHα)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08917 丙酮酸脫氫酶α(PDHα)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa) ,適用種屬: Mus musculus (Mouse) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08918 己糖激酶1(HK1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08919 己糖激酶1(HK1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1) ,適用種屬: Mus musculus (Mouse) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08920 己糖激酶1(HK1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1) ,適用種屬: Rattus norvegicus (Rat) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08921 Ⅳ型膠原(COL4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Collagen Type 人抵抗素ELISA檢測試劑盒IV (COL4) ,適用種屬: Rattus norvegicus (Rat) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08922 中期因子(MK)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Midkine (MK) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08923 胰島素樣生長因子1(IGF1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) ,適用種屬: Bos taurus; Bovine (Cattle) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08924 同型半胱氨酸(HA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Homocysteic Acid (HA) ,適用種屬: General ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08925 細胞間粘附分子1(ICAM1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) ,適用種屬: Canis familiaris; Canine (Dog) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08926 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08927 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1) ,適用種屬: Rattus norvegicus (Rat) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08928 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α5(GSTα5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 5 (GSTa5) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08929 C-型鈉尿肽(CNP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for C-Type Natriuretic Peptide (CNP) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08930 氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
XR-E-08931 氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb) ,適用種屬: Rattus norvegicus (Rat) ,規(guī)格: 48T/96T
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