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更新時(shí)間:2024-07-25 17:28:59瀏覽次數(shù):461次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線貨號(hào) | CS-X2955 | 規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 組織來(lái)源 | 心臟組織 |
細(xì)胞保存方法:
(一)細(xì)胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái);
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作者;
8. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
產(chǎn)品信息:
貨號(hào) | CS-X2955 | 組織來(lái)源 | 心臟組織 |
傳代特性 | 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:人心肌細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 人心肌細(xì)胞分離自心臟組織;心臟是脊椎動(dòng)物身體中最重要的一個(gè)器官,主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開(kāi),故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng),向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無(wú)機(jī)鹽、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心肌細(xì)胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀;細(xì)胞培養(yǎng)2h后開(kāi)始貼壁,呈梭形;到12h左右,細(xì)胞開(kāi)始伸出偽足,呈菱形、多角形;細(xì)胞分離培養(yǎng)48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)搏動(dòng);心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點(diǎn),并具有自發(fā)性節(jié)律搏動(dòng),且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡(jiǎn)便、定量、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn)。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動(dòng)力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié),研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué)、凋亡、受體下調(diào)、缺血預(yù)處理、信號(hào)通路、對(duì)作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對(duì)其安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景,對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。 5.方法簡(jiǎn)介: 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人心肌細(xì)胞采用膠原酶-yi酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人心肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml) 培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動(dòng)試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng):
1)、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細(xì)胞在液氮中可長(zhǎng)期凍存無(wú),而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),無(wú)菌且無(wú)色(以0. 22micron FGLP Telflon過(guò)濾或是直接購(gòu)買(mǎi)無(wú)菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人真皮淋巴上皮細(xì)胞 | 人抗腦皮質(zhì)(CC)自身抗體ELISA檢測(cè)試劑盒 |
HuH-7 (人肝癌細(xì)胞) | 人神經(jīng)氨suanmei(NA)檢測(cè)試劑盒 |
IMR-90 (人胚肺成纖維細(xì)胞) | 人酒石suan鹽抵抗的suan性磷suanmei(TRAP)檢測(cè)試劑盒 |
Jurkat, Clone E6-1 (人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) | 人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)檢測(cè)試劑盒 |
KiMA (人胚腎上皮細(xì)胞) | 豬腸病毒RT-PCR試劑盒 |
L1210 (小鼠白血病細(xì)胞) | 菟絲子染料法PCR鑒定試劑盒 |
LLC-WRC 256 [Walker 256] (大鼠腹水癌細(xì)胞) | 非洲馬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
L-WRN(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞) | 神經(jīng)肉孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
MA-782 (小鼠乳腺癌細(xì)胞) | 假結(jié)核耶爾森菌PCR試劑盒 |
MDA-MB-157 (人乳腺癌細(xì)胞) | 人腺病毒D43型PCR試劑盒 |
MDA-MB-468-06 (人乳腺癌細(xì)胞) | 三叉奧斯特線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
MM.1S (人IgA- 骨髓瘤細(xì)胞) | 緊密著色霉PCR檢測(cè)試劑盒 |
MGC80-3 (人胃癌細(xì)胞) | 人心肌細(xì)胞結(jié)核分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
MS751 (人子宮頸表皮癌細(xì)胞) | 塞內(nèi)加谷病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
NCCIT (人畸胎癌細(xì)胞) | 猴痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
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