封閉液(用PBS配置，含曲拉通X-100)免疫檢測

商品介紹：

本品是新一代的快速高效封閉液，總體效果優(yōu)于傳統(tǒng)的基于BSA(牛血清白蛋白)、脫脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封閉液及國外同類產(chǎn)品，可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等實驗中的封閉、一抗或二抗的稀釋。本產(chǎn)品配制在PBS中，含有適當濃度Triton X-100。 按照每張膜封閉需要5-10ml封閉液計算，一個包裝的本產(chǎn)品 可以封閉10-20張膜。

商品屬性：

本封閉液快速高效。封閉時間通常僅需5-15分鐘，并且和BSA、脫脂奶粉、酪蛋白等傳統(tǒng)封閉液以及國外同類的快速 封閉液相比，顯示出更強的信噪比(參考下圖)。

本封閉液封閉后背景極低。本封閉液不含血清和白蛋白，確保高的信噪比。

本封閉液兼容性好，兼容辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶和生物su標記的二抗。本產(chǎn)品中添加了不影響HRP和AP活性的防腐劑，不會干擾HRP或AP標記二抗的檢測。同時本產(chǎn)品不含生物su，不會干擾基于生物su的檢測。

本封閉液使用靈活。本產(chǎn)品配制在含有適當濃度Triton X-100的PBS中，可以直接用于相關(guān)實驗，但也可以根據(jù)實驗需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至終濃度為0.05%-0.1%后用于封閉、一抗或二抗的稀釋。

注意事項：

1. 本產(chǎn)品推薦僅使用一次，重復使用可能會導致封閉效果下降。但對于一些信噪比很高的一抗，例如一些內(nèi)參抗體，本封閉液可以重復使用2-3次。回收的封閉液請勿與未使用 過的封閉液混合。

2. 通常本產(chǎn)品用于PVDF膜及NC膜時的封閉時間為5-15分鐘。對于一些背景非常高的抗體，可以嘗試將封閉時間延長為30-60分鐘。此外，如有特殊需要，也 可以4℃封閉過夜。

3. 由于沒有任何一種封閉液是適用于所有實驗體系的，因此對于一些特殊的實驗，可能需要根據(jù)具體情況考慮使用其它更合適的封閉液。

4. 取放PVDF膜和NC膜應使用平頭鑷子，并僅輕輕夾取其邊角，操作過程須避免膜表面產(chǎn)生劃痕、折痕或壓痕等痕跡。

5. PVDF膜一經(jīng)浸潤和活化，需一直保持濕潤，根據(jù)Western進行到的具體步驟可放置于western轉(zhuǎn)膜液或洗滌液等適當溶液中，否則可能會產(chǎn)生難以封閉的異 常背景。

儲存條件：4℃，有效期一年。

步驟和注意事項：?

準備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養(yǎng)：?

準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細胞凍存與復蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復蘇則是將凍存的細胞系恢復到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數(shù)：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù)，?細胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應（?PCR）?：?

準備PCR反應所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應液配制表制備反應液。?

在反應器中加入反應液，?開始PCR反應。?

PCR反應的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉(zhuǎn)染：?

準備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：