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貨號	CS-X3227	規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶
生長特性	貼壁	組織來源	腦組織

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3227	組織來源	腦組織
傳代特性	不增殖；不傳代	培養(yǎng)基	含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態(tài)	梭形、多角形	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件		換液頻率	每2-3天換液一次

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細胞
2.組織來源：腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面，即外側(cè)面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質(zhì)細胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在銀浸染標本中，少突膠質(zhì)細胞比星狀膠質(zhì)細胞小，其突起也較小而少，呈珠狀，故被稱為少突膠質(zhì)細胞或寡突膠質(zhì)細胞。但是用特異性免疫細胞化學染色顯示的少突膠質(zhì)細胞，其突起并不少，而且還有許多分支。少突膠質(zhì)細胞的主要功能是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結(jié)構(gòu)、協(xié)助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護神經(jīng)元的正常功能。其異常不僅會導致中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘病變，還會引起神經(jīng)元損傷或精神類疾病，甚至可以引發(fā)腦腫瘤。根據(jù)少突膠質(zhì)細胞的分布和位置可分為三種：①束間少突膠質(zhì)細胞（interfasicular-oligodendrocyte），分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的白質(zhì)的神經(jīng)纖維束之間；②神經(jīng)細胞周少突膠質(zhì)細胞（perineuronal-oligodendrocyte），分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)區(qū)，常位于神經(jīng)細胞周圍，與神經(jīng)細胞的關(guān)系密切，故又稱為神經(jīng)細胞周衛(wèi)星細胞（perineuronal-satellite-cell），但在神經(jīng)細胞胞體與此類細胞之間亦常有星形膠質(zhì)細胞的薄片狀突起分隔；③血管周少突膠質(zhì)細胞（pcrivascular-oligodendrocyte），主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的血管周圍。少突膠質(zhì)細胞形成的髓鞘膜是為特化和復雜動物細胞膜之一，其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。如半乳糖腦苷脂（GC），它是髓鞘的一種主要類脂，用GC抗體鑒別成熟的少突膠質(zhì)細胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來，神經(jīng)發(fā)育學科進展較快，更多的少突膠質(zhì)細胞分子標記物被鑒定出來，如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細胞采用yi蛋白酶消化、混合細胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細胞經(jīng)GC（Galactocerebroside）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性不增殖；不傳代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細胞

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì)，應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠脂肪干細胞	人甘膽suan(CG)試劑盒ELISA
人子宮平滑肌細胞	人軸突生長誘向因子1(Ntn1)試劑盒elisa
兔骨骼肌細胞	人蛋白mei體(prosome,macropain)亞基,β型,1(PSMB1)檢測試劑盒
兔肌源性干細胞	人Stathmin 1(STMN1)ELISA檢測試劑盒
兔臍帶間充質(zhì)干細胞	本迪布焦型埃博拉病毒RT-PCR試劑盒
兔外周血單個核細胞	白色念珠菌PCR檢測試劑盒
兔主動脈平滑肌細胞	豬肺炎支原體PCR檢測試劑盒
小鼠表皮黑色素細胞	大腸彎曲桿菌、海鳥彎曲桿菌16S rRNA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法)
小鼠腸平滑肌細胞	駱駝痘病毒PCR試劑盒
小鼠肺成纖維細胞	禽腎炎病毒2型RT-PCR試劑盒
小鼠肝動脈內(nèi)皮細胞	通用/H5亞型（AIV-U/AIV-H5）核suan檢測試劑盒
小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細胞	馬傳染性貧血（EIAV）核suan檢測試劑盒
小鼠鞏膜成纖維細胞	大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細胞螺桿菌通用PCR試劑盒
小鼠頜下腺上皮細胞	病毒H5N2亞型PCR檢測試劑盒
小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞	轉(zhuǎn)基因植物S基因PCR檢測試劑盒