myPOLS Biotec正在開發(fā)新一代的DNA聚合酶

       myPOLS Biotec是一家來自康斯坦茨大學的生物技術(shù)公司，來自Andreas Marx教授的研究小組。憑借我們在高通量DNA聚合酶設計方面的專業(yè)知識，我們?yōu)槟膽枚ㄖ泼浮?/p>

       研發(fā)活動包括：

       改進的DNA聚合酶用于SNP檢測和甲基化特異性PCR。

       病原體檢測分析，例如用于流感和諾如病毒診斷。

       具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性的熱穩(wěn)定DNA聚合酶。

       抑制劑抗性聚合酶，用于從樣品中直接PCR，如全血，唾液，細菌，細胞 - 顆粒，植物等。

Isotherm2G DNA聚合酶

myPOLS Biotec正在開發(fā)新一代的DNA聚合酶

用于和可靠的應用，例如個性化醫(yī)療，病原體檢測，DNA和RNA診斷，法醫(yī)學等等。

Isotherm2G DNA聚合酶

       是一種嗜溫性DNA聚合酶，非常適合等溫擴增。它可以從具有高鏈置換活性的DNA和RNA模板合成DNA。Isotherm2G已被突變，以提高反轉(zhuǎn)錄活性。在55-70°C之間活躍。Isotherm2G DNA聚合酶是等溫擴增反應的優(yōu)先選擇，如環(huán)介導的等溫擴增（LAMP），鏈置換擴增（SDA），滾環(huán)擴增（RCA），分枝擴增（RAM），基因組擴增等。Isotherm2G DNA聚合酶以8 U / µl含甘油溶液的形式提供。它與足夠量的10x反應緩沖液一起使用，該緩沖液已針對等溫擴增進行了優(yōu)化。緩沖液中含3.25 mM鎂離子，終濃度為1x。鎂，引物和dNTPs的宜濃度在很大程度上取決于所應用的應用，應該對其進行優(yōu)化。

Volcano2G DNA聚合酶

       Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高級版本，具有進一步改善的逆轉(zhuǎn)錄活性。該酶是一種經(jīng)過工程改造的，極耐熱的逆轉(zhuǎn)錄酶和組合的DNA聚合酶，可通過定向的人工進化獲得。Volcano2G DNA聚合酶可直接從RNA模板（無需等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟）直接促進“零步驟" RT-PCR，因為逆轉(zhuǎn)錄與循環(huán)PCR延伸步驟中的DNA擴增同時進行。這也允許在高溫下進行逆轉(zhuǎn)錄反應，從而將在高溫下融化的RNA中強大的二級結(jié)構(gòu)所遇到的問題降至低。 

       Volcano2G DNA聚合酶包含熱啟動劑配制的，具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性的工程穩(wěn)定的熱穩(wěn)定DNA聚合酶和穩(wěn)健的Taq DNA聚合酶的酶混合物?；谶m體的熱啟動劑設計用于在低溫下（例如，在移取反應混合物時）阻斷非特異性DNA聚合酶活性，但會在高于50-55°C的溫度下分解，從而釋放出現(xiàn)已*活化的DNA聚合酶。

       Volcano2G DNA聚酶作為5 U / µl甘油庫存與適當?shù)?x Volcano反應緩沖液一起運輸，該緩沖液針對60-300 bp的擴增子進行了優(yōu)化。Volcano2G逆轉(zhuǎn)錄酶可以可靠地從≥1 ng的總RNA輸入中檢測RNA靶標。它不需要Mn 2+即可  獲得宜活性。但是，可以通過向反應中添加Mn 2+來進一步優(yōu)化某些檢測方法（建議范圍是0.5-1 mM，未提供Mn 2+）。

       RT-PCR活性：已對 Volcano3G RT-PCR Mix進行了成功的RT-PCR性能測試。在實時PCR循環(huán)儀中從人總RNA提取物中擴增出151 bp片段（HPRT1 mRNA），并可視化為單個擴增產(chǎn)物。

      DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)控Volcano3G DNA聚合酶活性并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。
酶濃度由蛋白質(zhì)特異性染色確定。
帶有“ 0步"方案的便捷RT-PCR零步協(xié)議節(jié)省時間
      跳過逆轉(zhuǎn)錄步驟。不需要等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟。 
      Volcano2G是一種具有PCR活性的逆轉(zhuǎn)錄酶，非常穩(wěn)定，在95°C下的半衰期> 40分鐘。

靈敏的RNA檢測      當添加實時PCR染料時，Volcano2G DNA聚合酶也可用于實時PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結(jié)構(gòu)域，使其也適用于基于水解探針的分析。如此處所示，通過使用基于探針的qPCR分析和零步RT-PCR方案，使用總RNA的10倍稀釋系列檢測了NONO mRNA。來自細胞的直接RT-PCR      對于細胞RNA的可靠RT-PCR，樣品制備步驟*。然而，這些步驟費力，費時并且需要額外的消耗品。使用我們的VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液，您可以用快速便捷的“零步長"方案代替費力的RNA制備。節(jié)省時間和金錢      VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液具有簡化的“零步驟"工作流程，使您可以規(guī)避費力的純化和提取步驟，從而節(jié)省了時間和金錢。

出色的靈敏度     

 VolcanoCell2G RT-PCR 2x實現(xiàn)了低至單個細胞的檢測靈敏度。在此示例中，按照VolcanoCell2G協(xié)議從單個隆德人中腦（LUHMES）細胞中檢測到GAPDH mRNA。Isotherm2G DNA polymerase      Isotherm2G DNA聚合酶是一種嗜溫DNA聚合酶，它從DNA和RNA模板合成DNA，具有高鏈置換活性。Isotherm2G是原始Isotherm DNA聚合酶的下一代，具有進一步改善的逆轉(zhuǎn)錄活性。宜溫度（55-70°C）使Isotherm2G DNA聚合酶成為等溫擴增反應的優(yōu)先選擇，如環(huán)介導等溫擴增（LAMP），鏈置換擴增（SDA），滾環(huán)擴增（RCA），衍生物擴增（RAM），基因組擴增等。＃8801S Isotherm2G DNA聚合酶 1600 U，8U /μl，200μl＃8801M Isotherm2G DNA聚合酶 8000 U，8U /μl，1000μl就是這么簡單：只需在59°C溫育30分鐘，就可以使用LAMP方法擴增DNA目標（紅色曲線）和RNA目標（藍色曲線）。Isotherm可用于RCA，SDA，RAM，LAMP和許多其他放大技術(shù)。      Isotherm DNA聚合酶也具有非常好的逆轉(zhuǎn)錄活性。擴增后，可以進行熔解曲線測量以確認特定產(chǎn)物的產(chǎn)生。因此可以進行DNA和RNA檢測，從而實現(xiàn)簡單的反應設置，快速的反應時間和閉管系統(tǒng)。應用• 快速，等溫檢測和鑒定DNA和RNA靶標• 逆轉(zhuǎn)錄• 實時等溫檢測• LAMP，SDA，RCA，RAMP• 入門擴展反應設置零件 卷 終濃度底漆混合物（各種濃度） 各種μl 各個dNTPs（10 mM） 1μl 400μM10 x Isotherm2G反應緩沖液 2.5μl 1X等溫線DNA聚合酶8 U /μl 1μl 8 U /反應模板/樣品提取物 各種μl 各個不含核酸酶的水 總反應體積高達25μl  將所有組件保存在冰上。在使用前仔細旋轉(zhuǎn)并混合所有溶液。 引物混合物和濃度很大程度上取決于所采用的等溫反應方法。Isotherm2G和Isotherm2G反應緩沖液不含熒光染料。對于實時測量，請?zhí)砑舆m量的合適染料。詳細的產(chǎn)品說明內(nèi)容Isotherm DNA聚合酶以含有甘油的8U /μl溶液形式提供。它配有針對等溫擴增優(yōu)化的10倍反應緩沖液。質(zhì)量控制DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)測等溫線活性并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。通過蛋白質(zhì)特異性染色確定酶濃度。有關(guān)批次特定濃度，請通過info@mypols.de查詢更多信息。 法律信息某些等溫擴增方法可能受到保護。購買此產(chǎn)品不會向購買者傳達使用所購產(chǎn)品進行任何商業(yè)目的的任何等溫擴增方法的合法權(quán)利。存儲本產(chǎn)品采用冷藏包裝。請在抵達-20°C時存放產(chǎn)品。