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伊萊博生物科技（上海）有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè),大中小型動(dòng)物實(shí)驗(yàn),細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù) |
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更新時(shí)間：2025-07-24 16:42:14瀏覽次數(shù)：88
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一、體外受精實(shí)驗(yàn)定義與技術(shù)原理
動(dòng)物體外受精（IVF） 指在人工模擬的體內(nèi)環(huán)境中，使哺乳動(dòng)物的精子和卵子完成受精過(guò)程的技術(shù)。受精后形成的胚胎可移植至受體子宮發(fā)育，所得后代稱“試管動(dòng)物"（test-tube animal）。
核心生物學(xué)原理：
精子獲能（Capacitation）：
精子需去除表面“去能因子"（如糖蛋白），通過(guò)添加肝素、鈣離子或血清白蛋白誘導(dǎo)獲能，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力與穿透卵子能力。
獲能過(guò)程依賴物種特異性條件（小鼠需30分鐘，豬需2–3小時(shí)）。
卵母細(xì)胞成熟（Oocyte Maturation）：
體內(nèi)成熟卵子可直接使用；未成熟卵子需體外培養(yǎng)至MII期（第二次減數(shù)分裂中期）。
受精兼容性：人工環(huán)境需模擬輸卵管生理?xiàng)l件（溫度、pH、滲透壓、營(yíng)養(yǎng)）以支持精卵結(jié)合。
二、體外受精實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作流程
1. 卵母細(xì)胞采集與處理
| 方法 | 適用場(chǎng)景 | 操作要點(diǎn) |
|---|---|---|
| 超數(shù)排卵法 | 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（小鼠、大鼠） | 注射FSH/LH激素誘導(dǎo)多排卵，從輸卵管采集成熟卵子 |
| 活體卵巢穿刺法 | 小牲畜（牛、羊）臨床操作 | 超聲或腹qiang鏡引導(dǎo)采集活體卵巢卵子 |
| 宰殺后卵巢采集法 | 屠宰場(chǎng)資源利用 | 取新鮮卵巢分離未成熟卵子，體外培養(yǎng)成熟 |
2. 精子采集與獲能
采集：附睪穿刺或精液收集。
獲能處理：
化學(xué)法：添加肝素（牛）、鈣離子載體（小鼠）。
生物法：與含卵丘細(xì)胞的卵泡液共培養(yǎng)。
3. 體外受精
| 技術(shù) | 原理 | 應(yīng)用場(chǎng)景 |
|---|---|---|
| 共培養(yǎng)法 | 精卵在培養(yǎng)液中自然結(jié)合 | 常規(guī)IVF（牛、小鼠） |
| 顯微注射法（ICSI） | 直接注入單個(gè)精子至卵胞質(zhì) | 低活力精子或基因編輯動(dòng)物 |
4. 胚胎培養(yǎng)與評(píng)估
培養(yǎng)基：KSOM+AA（小鼠）、SOF（牛）、TALP系列（跨物種）。
發(fā)育監(jiān)測(cè)：形態(tài)學(xué)分級(jí)。
5. 胚胎移植或冷凍
移植：同步受體發(fā)情周期，手術(shù)/非手術(shù)法植入子宮。
冷凍保存：液氮（-196℃）長(zhǎng)期儲(chǔ)存遺傳資源。
