亚洲视频自拍偷拍,国产老女人精品毛片久久,欧美性猛交xxxxx免费看,日韩爱爱网站,欧美精品在线观看视频 ,一级中国毛片,av福利免费

上海安研商貿(mào)有限公司

富半*肝素結(jié)合蛋白61抗體說明書

時間:2013-2-25閱讀:376
分享:

富半*肝素結(jié)合蛋白61抗體說明書

siRNA小干擾RNA

 

 

 

l  *天:準(zhǔn)備細(xì)胞

 

健康的細(xì)胞是成功轉(zhuǎn)染的要求,在轉(zhuǎn)染前明確細(xì)胞的生存狀態(tài)

 

對于貼壁細(xì)胞:

 

1,吸棄培養(yǎng)基,用*、EDTA、或其他合適的方法分散細(xì)胞,在*化前,用無菌的1X PBS漂洗細(xì)胞2次。

 

2,一旦細(xì)胞分散,用4倍體積的含10% 胎牛血清不含抗生素的生長培養(yǎng)基(如DEME,RMPI1640)稀釋懸浮液 。

 

(注意:這個階段使用不含抗生素的培養(yǎng)基是轉(zhuǎn)染成功的關(guān)鍵)

 

3,1,000 rpm離心5分鐘,去除培養(yǎng)基,用不含抗生素的培養(yǎng)基重懸沉淀

 

4,轉(zhuǎn)移細(xì)胞到12孔的細(xì)胞培養(yǎng)板 以便細(xì)胞過夜培養(yǎng)后,細(xì)胞覆蓋率達(dá)60-80%

 

(注意:細(xì)胞覆蓋率也是成功轉(zhuǎn)染的關(guān)鍵)

 

對于懸浮細(xì)胞:

 

1,1,000 rpm離心5分鐘

 

2,去除培養(yǎng)基,用不含抗生素的含10% 胎牛血清的培養(yǎng)基重懸沉淀

 

3,轉(zhuǎn)移細(xì)胞到12孔的細(xì)胞培養(yǎng)板或轉(zhuǎn)到多聚賴氨酸包被的8孔板中,以便細(xì)胞過夜培養(yǎng)后,細(xì)胞覆蓋率達(dá)60-80%

 

(注意:多聚賴氨酸包被是使懸浮細(xì)胞黏附到板底必須的)

 

富半*肝素結(jié)合蛋白61抗體說明書

l  第二天

 

 準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染試劑和轉(zhuǎn)染

 

 注意:對于不同的實驗?zāi)康挠胁煌牟僮鞑襟E,請根據(jù)試驗需要選擇下面介紹的操作步驟。

 

l  對于蛋白和轉(zhuǎn)錄檢測

 

注意:當(dāng)在組織培養(yǎng)板中進(jìn)行不同劑量的siRNA轉(zhuǎn)染時,轉(zhuǎn)染試劑和siRNA轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基的用量需要與不同孔的表面積成比率。

 

1,對每一次轉(zhuǎn)染,在一個無菌的小管里準(zhǔn)備下面的混合物 這一步無關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)類型

 

 (A) 加3.6ul 10uM的siRNA到40ul siRNA轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基中,輕柔混合,在室溫中放置15分鐘 (注意:如果需要低濃度的siRNA,用siRNA稀釋緩沖液進(jìn)行稀釋)

 

(B)加2.4ul siRNA轉(zhuǎn)染試劑到40ul的siRNA轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基中,輕柔混合,室溫放置5分鐘。

 

注意:雖然siRNA轉(zhuǎn)染試劑對許多細(xì)胞都有很高的轉(zhuǎn)染效率,但并不是適用于所有的細(xì)胞

 

 2, 5分鐘后,混合A和B形成siRNA-siRNA轉(zhuǎn)染試劑混合物,輕柔混合,室溫孵育20分鐘。

 

 3, 然后,向每個含有siRNA-siRNA轉(zhuǎn)染試劑混合物的管中加入0.32ml的siRNA轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基,輕柔混合

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),環(huán)保在線對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。

溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

在線留言