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  • 手工洗板與自動洗板之差異

    在Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒試驗中,洗板是非常重要的過程。酶聯(lián)免疫試驗(ELISA)洗滌過程雖不是一個反應過程,但卻也決定著實驗的成敗?。ELISA就是通過洗滌來達到分離游離和結合的酶標記物的目的,通過洗滌以清除殘留在微孔板中未能與固相抗原或抗體相結合的物質,以及在反應過程中的非特異性吸附于固相載體上的干擾物質。聚苯乙烯對蛋白質的吸附是普遍的,在ELISA測定的反應過程中應盡量避免非特異性吸附,洗滌時又應將這些非特異性吸附的干擾物質洗滌掉。由于“ELISA檢測試劑盒”具有的特異性,抗原抗體的結合發(fā)
  • ELISA實驗要點:洗滌是關鍵

    優(yōu)化ELISA的重點之一在于洗滌。洗滌步驟可降低未結合抗體所引起的背景信號,從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異的結合事件被保留,在最后一步產生信號。而不充分的洗滌會導致差異和高背景,從而帶來不理想的結果。本文將為你介紹一些利用自動洗板機來洗滌ELISA平板的技巧。免疫分析,比如ELISA,一般包含兩個或以上的孵育步驟,中間以洗滌隔開。ELISA通常在96孔板中開展,其上包被了結合抗原或抗體。在封閉步驟后,包被后的平板首先與一抗或抗原孵育。隨后通過一些洗滌步驟去除未結合(低親和力)
  • 雞傳染性支氣管炎(IBV)ELISA試劑盒--定性 說明書

    本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測定雞血清,血漿及相關液體樣本中傳染性支氣管炎(IBV)表達。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞傳染性支氣管炎(IBV)表達。用純化的傳染性支氣管炎(IBV)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中傳染性支氣管炎(IBV)相結合,經(jīng)洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與HRP標記的傳染性支氣管炎(IBV)抗體結合,形成抗體-抗原-抗體復合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。
  • 人降鈣素原(PCT)ELSIA試劑盒使用方法及注意事項

    使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中降鈣素原(PCT)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人降鈣素原(PCT)水平。用純化的人降鈣素原(PCT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入降鈣素原(PCT),再與HRP標記的降鈣素原(PCT)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的降鈣素原(PCT)呈正相關。用酶標儀在450nm波
  • ELISA試劑盒各環(huán)節(jié)中常見問題及解決方法

    ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。下面分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法一、選擇試劑選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。二、加樣可能原因:1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;2)手工操作中,加樣板過
  • 人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒使用說明書

    本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)水平。用純化的人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C),再與HRP標記的肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉
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    ELISA檢測系統(tǒng)可謂是免疫學反應應用到科研生產中最為廣泛最為靈敏的技術手段??墒窃谛吕鲜植僮鬟^程中總是會出現(xiàn)或大或小的問題,現(xiàn)在給我十個八個的從包被到顯色,一個工作日基本搞定。下面就由我拋磚引玉地來說一下,做ELISA的經(jīng)驗總結:1、包被原的性質很重要,蛋白濃度,是否降解,這關系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保存抗原很重要,我做重組蛋白時,師兄都嚴格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。還有有的包被原可能不是蛋白,對于sheng物素和脂類物質或小分子物質我們要事先對其改造再加以包被,
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