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ELISA試劑盒實驗技術(shù)中抗原抗體的反應(yīng)
一、抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈(L)和兩個重鏈(H)的單體組成。Ig的輕鏈是相同的，有κ(kappa)和λ(Lambda)兩種型別。五類Ig的重鏈結(jié)構(gòu)不同，這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ(gamma)鏈和μ(mu)鏈。重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異，稱為可變區(qū)，分別用VH和VL表示。兩 -
ELISA技術(shù)自20世紀70年代初問世以來，發(fā)展非常迅速，目前被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等許多領(lǐng)域。其基本原理是根據(jù)抗原或抗體能在一定條件下結(jié)合到固相載體的表面仍保持其免疫活性，抗原或抗體與酶結(jié)合形成的結(jié)合物仍能保持免疫學(xué)和酶的活性。結(jié)合物與相應(yīng)的抗原、抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入相應(yīng)的酶底物的顏色反應(yīng)來判斷有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)，而且顏色的深淺與相應(yīng)的抗原或抗體的量在一定的范圍內(nèi)成正比。由于抗原、抗體的反應(yīng)在1種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游
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人類嗜T淋巴細胞病毒(HTLV)elisa試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中類嗜T淋巴細胞病毒(HTLV)表達。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人類嗜T淋巴細胞病毒(HTLV)表達。用純化的人類嗜T淋巴細胞病毒(HTLV)抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中類嗜T淋巴細胞病毒(HTLV)相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標記的類嗜T淋巴細胞病毒(HTLV)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過
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白細胞介素即是由多種細胞產(chǎn)生并作用于多種細胞的一類細胞因子。目前至少發(fā)現(xiàn)了38個白細胞介素，分別命名為IL-1~IL38，功能復(fù)雜，成網(wǎng)絡(luò)，復(fù)雜重疊；在免疫細胞的成熟、活化、增殖和免疫調(diào)節(jié)等一系列過程中均發(fā)揮重要作用，此外它們還參與機體的多種生理及病理反應(yīng)。免疫系統(tǒng)細胞的增殖、分化和功能受到一系列細胞因子的調(diào)節(jié)。根據(jù)細胞因子的結(jié)構(gòu)同源性可將其分為幾個蛋白質(zhì)家族，如IL-1家族、IL-6家族、IL-10家族、腫瘤壞死因子家族和造血因子家族等。白細胞介素穿插歸類為其中。白細胞介素是由多種細胞產(chǎn)生并作
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酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）可以用于：（1）檢測大分子抗原和特異性抗體等；（2）具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優(yōu)點。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。ELISA的樣本收集與運輸：利用ELISA進行檢驗常見的樣本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液,分泌物等，這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。ELISA實驗中的血清需采用血
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大鼠催乳素（PRL）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：48T30pg/ml-800pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中催乳素（PRL）含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠催乳素（PRL）水平。用純化的大鼠催乳素（PRL）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入催乳素（PRL），再與HRP標記的催乳素（PRL）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下
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本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中痢疾阿米巴（EH）表達。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人痢疾阿米巴（EH）表達。用純化的人痢疾阿米巴（EH）抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中痢疾阿米巴（EH）相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標記的痢疾阿米巴（EH）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標儀在450n
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結(jié)合物即酶標記的抗體（或抗原），是ELISA中至關(guān)重要的關(guān)鍵的試劑。良好的結(jié)合物應(yīng)該是既保有酶的催化活性，也保持了抗體（或抗原）的免疫活性。結(jié)合物中酶與抗體（或抗原）之間有恰當?shù)姆肿颖壤诮Y(jié)合試劑中應(yīng)盡量不含有或少含有游離的（未結(jié)合的）酶或游離的抗體（或抗原），此外，結(jié)合物尚要有良好的穩(wěn)定性。用于ELISA的酶應(yīng)符合以下要求：①純度高②催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高③專一性強④性質(zhì)穩(wěn)定⑤來源豐富⑥價格不貴⑦制備成酶結(jié)合物后仍繼續(xù)保存它的活性部分和催化能力⑧在受檢標本中不存在相同的酶⑨相應(yīng)底物易于制備和保存
