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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

兔骺軟骨分離自骨骺生長板；骨骺生長板位于長骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織，其中的骺軟骨細(xì)胞可分裂、成熟、肥大，終被骨組織所替換，對于長骨生長具有重要作用。幼稚的骺軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層，單個分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的骺軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形，染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細(xì)胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些骺軟骨細(xì)胞由同一個母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，骺軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，骺軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的骺軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骺軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骺軟骨采用膠原酶-聯(lián)合消化并軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA 試劑盒 96T/48T

One set of membrane protein (iNV) ELISA Kit 人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒

Humanglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanbonesialoprotein,BSPELISA試劑盒人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)分離試劑盒50次

HumanStaphylococalproteinA,SPAELISAKit人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin2(Eotaxin2/CCL24)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠絲蛋白結(jié)合LIM蛋白1(FBLIM1)ELISA試劑盒 ，英文名： FBLIM1 ELISA Kit

Mouse vitamin A (VA) ELISA Kit 小鼠A(VA)ELISA試劑盒

RatProgesterone,PROGELISAkit 大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHGH(Humangrowthhormone)ELISAKIT人生長激素規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞SPHK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKiX大鼠Ⅰ型膠原N末端肽規(guī)格：48T/96T

HA重組甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照 0.1mlRabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照)

EPHB6重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CLCF1 Protein Human 重組人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ERBB4 Protein Human 重組人 HER4 / ErbB4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

兔骺軟骨細(xì)胞Rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照 0.1mlRabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照)

CLCF1 Protein Human 重組人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ERBB4 Protein Human 重組人 HER4 / ErbB4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

EPHB6重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用