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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

兔氣管平滑肌分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一，在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用；能夠保持氣道張力，維持氣道管狀形態(tài)，從而有利于氣體流通，保持肺部通氣。氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一，其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Caenorhabditis elegans death gene (CED-3) ELISA Kit 人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)ELISA試劑盒

Humahrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 人血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Elisa牛結(jié)核病抗體檢測試劑盒2*96孔2*96孔

增強(qiáng)型HRP-DAB底物顯色試劑盒10次

MouseCyclin-D1ELISAKit小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠上腺素(E)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 ，英文名： IFN-γ ELISA Kit

Mouse ula sensitive C reactive protein (hs-CRP) ELISA Kit 小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白-3β(mouse MIP-3β) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-18(HumanIerleukin18)ELISAKIT人白介素18規(guī)格：48T/96T

通用型李屬壞死環(huán)斑病毒(PrunusNecroticRingspotVirus;PSV)試劑盒20次

ELISAKitGMP-140大鼠血漿α顆粒膜蛋白規(guī)格：48T/96T

SFRP1重組人 sFRP1 / SARP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

纖溶酶原(Plg)重組蛋白 Recombinant Plasminogen (Plg)

TMED4重組人 TMED4 / ERS25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CLK3 Protein Human 重組人 CLK3 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

兔氣管平滑肌細(xì)胞纖溶酶原(Plg)重組蛋白 Recombinant Plasminogen (Plg)

CLK3 Protein Human 重組人 CLK3 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

SFRP1重組人 sFRP1 / SARP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TMED4重組人 TMED4 / ERS25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用