小鼠檢測試劑盒原理 
利用離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜提取樣品總 RNA，在高效反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以 RNA 為模板，以 引物為起點(diǎn)合成與 RNA 模板互補(bǔ)的 cDNA 鏈。在熱啟動 Taq 酶的作用下，經(jīng)高溫變性、中溫退火 及延伸的循環(huán)，使特異 DN段的拷貝數(shù)放大一倍，經(jīng)熒光素標(biāo)記的探針與擴(kuò)增的 DNA 雜交，利 用 Taq 聚合酶的 5'→3'外切活性，使熒光探針的報(bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離，發(fā)出特異性熒光信號，利 用熒光 PCR 儀檢測特異性熒光信號，根據(jù)樣品 Ct 值的大小及擴(kuò)增曲線的形成情況判定結(jié)果。

小鼠檢測試劑盒注意事項(xiàng)：

1．所有接觸病料的物品均應(yīng)合理處置，以免污染實(shí)驗(yàn)室。

2．PCR  整個試驗(yàn)分配液區(qū)、模板提取區(qū)、擴(kuò)增區(qū)。流程順序?yàn)榕湟簠^(qū)→模板提取區(qū)→擴(kuò)增區(qū)。嚴(yán) 禁器材和試劑倒流。

3．所有試劑應(yīng)在規(guī)定的溫度儲存。-20℃保存的各試劑管使用前應(yīng)*融化，8000 rpm 離心 15 s， 使液體全部沉于管底，放于冰盒中，吸取液體時移液器吸頭盡量在液體表面層吸取，使用后立 即放回-20 ℃。

4．在 RNA 提取過程中，避免 RNA 酶污染，盡量縮短操作時間。

5．注意防止試劑盒組分受污染。不要使用超過有效期限的試劑，試劑盒之間的成分不要混用。

6．嚴(yán)格遵守操作說明可以獲得的結(jié)果。操作過程中移液、定時等全部過程必須精確。

7．反應(yīng)體系應(yīng)在特定配液區(qū)或者超凈工作臺中配制，整個實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格控制污染。

8．反復(fù)凍融試劑將減低檢測靈敏度，本試劑盒應(yīng)在 3 次內(nèi)用完，請嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。