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固相萃取-離子色譜法測定氟乙酸鈉含量

2010年06月12日 11:34:04人氣:908來源:上海禾工科學(xué)儀器有限公司

近年來,鼠藥中毒已經(jīng)成為一個嚴(yán)重的社會問題和環(huán)境問題,氟乙酰胺是鼠藥中毒的主要部分之一。氟乙酰胺劇毒,進入生物體內(nèi)容易轉(zhuǎn)化為氟乙酸鹽及其它物質(zhì)。受害生物體內(nèi)氟乙酰胺(氟乙酸鈉)含量極微,加上生物檢材成分復(fù)雜,要經(jīng)過復(fù)雜的前處理過程才能將其有效的提取,分離和富集,而且氟乙酰胺(氟乙酸鈉)分子小、極性大、難揮發(fā)、沒有明顯的紫外吸收,用常規(guī)的氣相色譜(GC)和液相色譜(HPLC)不能直接檢測,必需通過衍生化,在分子中引進能被高靈敏檢測的基團,以適應(yīng)于NPD和ECD等的GC檢測,或紫外和熒光的HPLC檢測;衍生化反應(yīng)又可能帶來新的雜質(zhì),使色譜圖復(fù)雜化,干擾增大,氟乙酰胺類毒藥是目前檢驗難度zui大的毒物之一。

  目前對氟乙酰胺(氟乙酸鈉)尚沒有一種統(tǒng)一準(zhǔn)確的檢測方法,因此建立一種簡單、易行、靈敏、快速的定性定量測定方法,解決日益增多的氟乙酰胺類鼠藥中毒案件的偵破,查明中毒原因,尋找毒源,有效的打擊犯罪,保障廣大人民群眾的生命財產(chǎn)具有非常重要的意義。

  本論文研究了用水提取,固相萃取裝置法純化、富集生物樣品中氟乙酸鈉的樣品前處理方法,用離子色譜作為監(jiān)控固相萃取回收率的手段。采用C18固相萃取柱和SAX陰離子交換柱兩種不同的原理的固相萃取法,C18固相萃取柱不保留氟乙酸鈉,用來除去檢材中大部分有機干擾成分,C18固相萃取柱萃取氟乙酸鈉回收率達98~108%,血樣中的回收率在85%以上;SAX陰離子交換柱則保留氟乙酸根離子,用小體積的洗脫液洗脫而使樣品富集,能夠同時凈化和富集氟乙酸鈉。通過對固相萃取條件的優(yōu)化,取得良好的萃取效果,用1.5mL的0.5mol/L的鹽酸做洗脫液,回收率為91%以上,富集倍數(shù)可達25倍,zui低能夠檢測0.001mg/L的氟乙酸鈉溶液,血樣中zui低能夠檢測到0.5mg/L,全程回收率在80%以上.

  本論文建立了用離子色譜測定生物樣品中氟乙酸鈉含量的方法。在0.2mL血液樣品中加入1mL純水,然后用乙腈沉淀蛋白質(zhì),待蛋白質(zhì)沉降后取上層清液經(jīng)0.45?m過濾頭過濾,濾液注進離子色譜儀進行氟乙酸鈉的定性和定量分析。用Dionex600離子色譜儀,配合電導(dǎo)檢測器,DionexIon PacAS11陰離子交換色譜柱(結(jié)合相應(yīng)的AG11保護柱),以2.0mmol/L的Na2B4O7溶液為淋洗液,25?L定量進樣環(huán),測定生物樣品中的氟乙酸鈉,在0.10~10.0?g/mL濃度范圍內(nèi)峰面積和質(zhì)量濃度呈良好的線性范圍(r2=0.9978),方法的檢測限為0.05ug/mL,實際測定了血液樣品的氟乙酸鈉,平均全程回收率在85%以上。該法也可用于食物和生物檢材中氟乙酸鈉的測定。本研究還對毛細管電泳測定氟乙酸鈉的方法進行了初步研究。

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